「ツッコミ百王選手権」では、ミルクボーイ(駒場孝、内海崇)、おいでやす小田、四千頭身・後藤拓実、見取り図・盛山晋太郎が、次々と出てくる“ボケ写真”に100秒間ツッコミ続ける。これには、他の出演者から「同じ写真なのにいろいろな目線でのツッコミがすごい」という声が上がる場面も。
「モノマネ百王」では、「ミラクルひかる&みかん」ペアと、2人合わせて350以上のモノマネレパートリーを持っている「原口あきまさ&ホリ」ペアが、100秒の曲で何個モノマネを披露することができるのか「100秒モノマネスペシャルメドレー」に挑戦。
その他にもさまざまな百王たちが登場する。
さらにTBS公式YouTubeチャンネル「YouTuboo」では、放送に先駆けて「ジェシー&チョコプラ・松尾モノマネ100秒」「ジェシーのツッコミ100秒」「チョコプラ・松尾IKKOでツッコミ100秒」のチャレンジ動画も随時配信される。
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